Norsk ME-forskning: Kommentar til Wyllers TGF-β publikasjon 4des2017

Der ble 4 desember 2017 publisert en ny forskningartikkel i tidskriftet Journal of Translational Medicine med tittel «Transforming growth factor beta (TGF-β) in adolescent chronic fatigue syndrome.«. Publikasjonen er et resultat av forskningsprosjektet NorCAPITAL, som har undersøkt barn og ungdommer i alderen 12-18 år rammet av sykdommen Myalgisk Encefalopati (ME)/Kronisk utmattelsessyndrom (CFS). Hovedforfatter er Vegard Bruun Wyller med Chinh Bkrong Nguyen, Judith Anita Ludviksen og Tom Eirik Mollnes.

I denne forskningsstudien ønsket forskerteamet å undersøke om der var forskjell i plasmaverdiene til det antatte anti-inflammatoriske cytokin/kjemokin TGF-β tre isoformer mellom ME-pasientene og de friske kontrollene. Dette ved bruk av multiplex cytokine assay, Bio-Plex Human TGF-β 3-plex. I en tidligere cytokin-studie ble det brukt Bio-Plex Human Cytokine 27-Plex Panel, begge i fra Bio-Rad Laboratories Inc.

Uansett hvor interessant publikasjonen er og assosiasjoner de har gjort, kan en ikke komme i fra at plasmaet som ble brukt er langt fra kvalitetsmessig tilfredsstillende…

Kommentar:

Denne gangen har Wyller med medarbeidere publisert de individuelle testverdiene, altså rådataene, til pasienter og kontroller i suplementfil 2 Tabell S1.

De inviduelle verdiene til de unge friske norske 15-årige kontrollene, viser at over 50 % av de ville vært dauesjuk om ikke dau.

TGFbeta verdier_friske kontroller_Wyller et al 2018

 

Quest-laboratorier i USA har særskilte strenge rutiner og protokoller når det skal måles TGF-beta, dette for å unngå feil måleverdi. Quest bruker også referanseverdi; 344-2382 pg/mL


Tom Eirik Mollnes har nylig gjennomført en studie med målsetting å undersøke Bio-Plex Human Cytokine 27-Plex Panel fra Bio-Rad Laboratories Inc. med hensikt å finne ut om feks serum eller plasma er best, om bruk av feks EDTA tuber er bedre enn andre, om verdiene endrer seg ved frysing og opptining, temperatur/tid mm, samt finne referanseintervaller. Studien ble publisert i september 2017.

Hennø LT et al. (2017). Effect of the anticoagulant, storage time and temperature of blood samples on the concentrations of 27 multiplex assayed cytokines – Consequences for defining reference values in healthy humans. Cytokine. 2017 Sep;97:86-95. doi:10.1016/j.cyto.2017.05.014. Epub 2017 Jun 6. [PubMed] [henn2017]

Mollnes, som også nylig fikk annerkjennelse for sitt forskningsbidrag, burde i dette tillfellet sett at det frosne plasma fra pasient og kontroller fikk så store avvik, at blodplasmaet var skjæmt (spoiled, ødelagt).

Likevel kan en noen ganger undre seg, jf resultatene til figur 4:

«Finally, the reference ranges of the cytokines in 162 healthy controls were estimated using the upper 95th percentile and the 2.5–97.5th percentile values from EDTA plasma samples. We suggest the upper 95th percentile values to be the best estimate of the reference range instead of 2.5th and 97.5th for two reasons. First, from a pathophysiological point of view an increased value of a cytokine would be more frequent and reflect a disease state than a low value.«

Fra før vet vi at metoden de bruker i Norge ikke er like følsomt som utstyret for cytokinanalyser på Stanford Universitet. Noe som betyr nedre grense for detektering. Her går Mollnes og medarbeidere  i Hennø et al. så langt i å påstå at alle cytokiner/kjemokiner, altså signalproteinene og kommunikasjonssystemet til immunsystemet, og når det er indikasjon for sykdomsaktivitet er verdier over 95 % KI. Noe som reiser en rekke spørsmål, som pro-inflammtorisk vs anti-inflammatorisk, og hva skjer om noen produserer for lave mengder av anti-inflammtoriske cytokiner, konsekvens?

Det blir for patetisk. null-verdier, gjennomsnitt, funskjonelle verdier,

Sluttord:

Som sagt tidligere er den nye publikasjonen til Wyller interessant, men en kan undre seg over hvorfor en publiserer med så åpenbare feil. Det eneste som teller er faktisk presis, nøyaktig og sannferdig forskning. Jeg antar at noen (fagfolk) vil påpeke metodeforstyrrelsene.

I denne sammenheng vet vi heller ikke hvor nøyaktige de to andre publikasjonene til Wyller, hvor den ene er cytokin-nivåer og den andre brukes cytokinverdier til å verifisere ME-kriterier. En vet riktignok at der ble brukt gjennomsnittverdier, selv verdier under detekteringsnivå LDL.

«Four cytokines (IL-15, eotaxin, G-CSF and GM-CSF)
had a large amount of missing data, and were excluded from further
analyses. Cytokine values below lower detection limit (LDL)
were replaced with a random value in the interval between zero
and LDL for each specific cytokine.»

Plasma cytokine expression in adolescent chronic fatigue syndrome.Wyller VB, Sørensen Ø, Sulheim D, Fagermoen E, Ueland T, Mollnes TE. Brain Behav Immun. 2015 May;46:80-6. doi: 10.1016/j.bbi.2014.12.025. Epub 2014 Dec 31. PMID: 25555530  [Download PDF]

.Vit mer om cytokiner her.

Legg igjen en kommentar

Fyll inn i feltene under, eller klikk på et ikon for å logge inn:

WordPress.com-logo

Du kommenterer med bruk av din WordPress.com konto. Logg ut /  Endre )

Google-bilde

Du kommenterer med bruk av din Google konto. Logg ut /  Endre )

Twitter-bilde

Du kommenterer med bruk av din Twitter konto. Logg ut /  Endre )

Facebookbilde

Du kommenterer med bruk av din Facebook konto. Logg ut /  Endre )

Kobler til %s

This site uses Akismet to reduce spam. Learn how your comment data is processed.